【BK-PCR16D】山東博科儀器以客戶為中心，以服務(wù)為宗旨，以創(chuàng)新為動(dòng)力。

　　儀器使用前的準(zhǔn)備

　　儀器校準(zhǔn)

　　定期對(duì)便攜式熒光定量PCR檢測(cè)儀進(jìn)行校準(zhǔn)是確保數(shù)據(jù)可靠的基礎(chǔ)。校準(zhǔn)過(guò)程要嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書進(jìn)行，通常需要使用標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品。比如，使用已知濃度的核酸標(biāo)準(zhǔn)品，按照檢測(cè)流程進(jìn)行操作，記錄儀器檢測(cè)出的結(jié)果，與標(biāo)準(zhǔn)品的實(shí)際濃度進(jìn)行對(duì)比。如果檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際濃度偏差較大，就需要對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整，直至檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

　　校準(zhǔn)周期應(yīng)根據(jù)儀器的使用頻率和環(huán)境條件來(lái)確定。如果儀器使用頻繁，或者處于高溫、高濕等惡劣環(huán)境中，校準(zhǔn)周期應(yīng)適當(dāng)縮短，一般建議每月進(jìn)行一次校準(zhǔn)。

　　試劑與耗材檢查

　　確保使用的試劑在有效期內(nèi)，且保存條件符合要求。例如，熒光定量PCR試劑通常需要在-20℃或-80℃冰箱中保存，運(yùn)輸過(guò)程中也要使用干冰等保持低溫。使用前要檢查試劑的外觀，如有渾濁、沉淀或變色等情況，應(yīng)停止使用。

　　耗材如反應(yīng)管、移液器槍頭等要保證無(wú)菌、無(wú)污染。使用前可對(duì)反應(yīng)管進(jìn)行外觀檢查，確保無(wú)破損、無(wú)變形。同時(shí)，要使用與儀器配套的耗材，以保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

　　樣本采集與處理

　　規(guī)范樣本采集

　　樣本采集是影響檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以采集血液樣本為例，要選擇合適的采血部位和采血方法。一般可選擇前腔靜脈或耳靜脈采血，使用一次性無(wú)菌注射器和采血管。采血過(guò)程中要避免溶血，因?yàn)槿苎獣?huì)釋放出血紅蛋白等物質(zhì)，干擾PCR反應(yīng)。

　　對(duì)于其他類型的樣本，如組織、唾液等，也要按照相應(yīng)的規(guī)范進(jìn)行采集。采集組織樣本時(shí)，要選取病變明顯的部位，避免采集到壞死組織;采集唾液樣本時(shí)，要讓被采集者充分漱口，減少食物殘?jiān)涂谇患?xì)菌的干擾。

　　正確處理樣本

　　采集到的樣本要及時(shí)進(jìn)行處理，防止樣本中的核酸降解。對(duì)于血液樣本，一般需要進(jìn)行離心分離血清或血漿;對(duì)于組織樣本，要進(jìn)行研磨、勻漿等處理，釋放出其中的核酸。

　　在樣本處理過(guò)程中，要注意防止交叉污染。使用不同的樣本處理工具，如移液器、離心管等，避免樣本之間的相互污染。同時(shí)，操作人員要佩戴手套、口罩等防護(hù)用品，防止自身攜帶的微生物污染樣本。

　　檢測(cè)過(guò)程控制

　　嚴(yán)格操作流程

　　按照儀器說(shuō)明書和試劑盒的操作流程進(jìn)行檢測(cè)，不得隨意更改步驟或參數(shù)。例如，在PCR反應(yīng)體系中，要準(zhǔn)確加入樣本、試劑和引物探針，控制好反應(yīng)體系的體積和濃度。反應(yīng)溫度和時(shí)間也要嚴(yán)格按照要求設(shè)置，如變性溫度一般為95℃左右，退火溫度根據(jù)引物的Tm值確定，延伸溫度一般為72℃左右。

　　在加樣過(guò)程中，要使用精確的移液器，確保加樣量準(zhǔn)確。加樣時(shí)要小心操作，避免產(chǎn)生氣泡，因?yàn)闅馀輹?huì)影響PCR反應(yīng)的進(jìn)行。

　　設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)

　　在每次檢測(cè)中，都要設(shè)置陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照。陰性對(duì)照使用不含目標(biāo)核酸的樣本，用于檢測(cè)試劑和操作過(guò)程中是否存在污染;陽(yáng)性對(duì)照使用已知濃度的目標(biāo)核酸樣本，用于驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度和準(zhǔn)確性;空白對(duì)照使用不含樣本和試劑的反應(yīng)體系，用于檢測(cè)儀器和環(huán)境的本底信號(hào)。

　　如果對(duì)照實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不符合要求，如陰性對(duì)照出現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)，說(shuō)明檢測(cè)過(guò)程中存在污染，需要重新進(jìn)行檢測(cè)。

　　儀器維護(hù)與保養(yǎng)

　　日常清潔

　　每次使用完便攜式熒光定量PCR檢測(cè)儀后，要及時(shí)進(jìn)行清潔。用柔軟的干布擦拭儀器表面，去除灰塵和污漬。對(duì)于儀器的光學(xué)部件，如光源、檢測(cè)器等，要使用專用的鏡頭紙或無(wú)塵布輕輕擦拭，避免刮傷。

　　定期清理儀器的散熱孔和風(fēng)扇，防止灰塵堵塞，影響儀器的散熱效果?？梢允褂梦鼔m器或小毛刷進(jìn)行清理。

　　定期維護(hù)

　　定期對(duì)儀器進(jìn)行全面的維護(hù)和檢查，如檢查儀器的電源、線路是否正常，儀器的各個(gè)部件是否松動(dòng)或損壞等。如果發(fā)現(xiàn)儀器存在問(wèn)題，要及時(shí)聯(lián)系專業(yè)維修人員進(jìn)行維修。

　　按照儀器說(shuō)明書的要求，定期對(duì)儀器進(jìn)行性能測(cè)試和校準(zhǔn)，確保儀器始終處于良好的工作狀態(tài)。